■ 產(chǎn)品簡介:
EGY48 酵母菌可用單雙雜實驗,轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行互作驗證或篩庫試驗。篩選標記為:his3,trp1,ura3 。EGY48-LacZ 酵母單雜系統(tǒng)需要 pB42AD 和 pLacZi 兩種質(zhì)粒配套使用。質(zhì)粒 pB42AD 的篩選標記為 TRP1 ,用于表達AD(來自皰疹病毒的88個氨基酸殘基組成的B42AD蛋白)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。質(zhì)粒pLacZi的篩選標志為 URA3 ,報告基因為 LacZ ,只有當 Bait 和 Prey 互作時才能啟動 LacZ 表達,在顯色培養(yǎng)基上顯藍色,從而確定 DNA 和蛋白有相互。本方案結(jié)合 LacZ 基因胞外表達顯色試劑盒進行互作驗證,采用稀釋點板的方法,與涂板的方法相比,更能直觀的體現(xiàn)出 DNA 和蛋白的互作,還能減少培養(yǎng)基的使用。
■ 注意事項:
載體注意事項:
1. 建議收到質(zhì)粒后請先轉(zhuǎn)化感受態(tài)(克隆菌株),再挑選單菌落重新提取后使用。
2. 轉(zhuǎn)化前請準確查找該質(zhì)粒對應(yīng)的抗生素、抗生素濃度、感受態(tài)(克隆菌株)和培養(yǎng)溫度。
3. 如有必要請測序后使用,我司網(wǎng)站檢索對應(yīng)貨號可下載質(zhì)粒圖譜。
培養(yǎng)基注意事項:
1. 一般情況下 pH 值不必調(diào)節(jié),建議測定一下 pH5.8±0.2 即可。
2. SD 培養(yǎng)基可能溶解不徹底或滅菌后有少量沉淀,不影響實驗進行。
3. SD 培養(yǎng)基滅菌后,顏色為白色至淺黃色。
感受態(tài)注意事項:
1. 一支感受態(tài)不建議分成兩份使用。
2. 如果轉(zhuǎn)化效率低,只有幾個單克隆,建議做 PCR 鑒定。
3. 篩選出來的單克隆,一般是圓形凸起、邊緣整齊、表面光滑濕潤、不透明、乳白色-淺黃- 淺粉色的菌落,有酵母氣味。
本試劑盒注意事項:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。